BioGems無血清細胞培養(yǎng)添加物—轉鐵蛋白和胰島素

白蛋白、胰島素和轉鐵蛋白等是無血清培養(yǎng)體系中細胞生長所必須的因子。

Biogems的人重組轉鐵蛋白和胰島素生物活性與天然蛋白相同，批間穩(wěn)定。這些蛋白由真核細胞重組表達，不含動物成分。質控嚴格，zui大程度地降低了污染的風險。

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一 胰島素和轉鐵蛋白在無血清培養(yǎng)中的作用

二 重組和提取的胰島素和轉鐵蛋白的區(qū)別

三 胰島素和轉鐵蛋白在無血清培養(yǎng)基中的使用濃度

一 胰島素和轉鐵蛋白在無血清培養(yǎng)中的作用

胰島素在無血清培養(yǎng)基中的作用

無血清或低血清培養(yǎng)基中，胰島素為必加組分，這是由胰島素對細胞的重要作用決定的。

我們都知道，胰島素在體內zui主要的功能是調節(jié)機體血糖水平。其實胰島素的作用非常

廣泛，包括調節(jié)蛋白質和脂肪的代謝，以及促進細胞生長等。

轉鐵蛋白在無血清培養(yǎng)基中的作用

轉鐵蛋白是通用的鐵轉運劑，其可通過幫助細胞調節(jié)對鐵的攝取量而維持細胞的穩(wěn)態(tài)，

進而有利于細胞的生長和增殖。

牛血清中含有牛種屬的轉鐵蛋白，由于轉鐵蛋白的保守性，牛轉鐵蛋白可對人和動物

細胞起到很好地保護和支持作用，因此培養(yǎng)基中通常要加入牛血清從而組成*培養(yǎng)基。無

血清培養(yǎng)基為達到與含血清培養(yǎng)基相同或相似的細胞培養(yǎng)性能，其中也必須添加轉鐵蛋白，

以實現(xiàn)對細胞鐵離子平衡的調節(jié)，以及對細胞生長和增殖的維持。

二 無血清培養(yǎng)基中應該添加提取的胰島素和轉鐵蛋白，還是重組的胰島素和轉鐵蛋白?

人胰島素的來源有限，無法滿足臨床和科研的需求，因此人們通常從?；蜇i的胰臟中提取獲得胰島素。

人血漿中轉鐵蛋白的含量豐富，約為 25mg/ml，占血漿總蛋白的 4%，而且轉鐵蛋白的種屬間交叉活性比較強，所以轉鐵蛋白多從人或牛的血漿中提取而得。

胰島素種屬間高度保守，豬和牛的胰島素與人的胰島素氨基酸序列上分別僅有 1 個和 3

個氨基酸的差異，所以豬和牛的胰島素*可以替代人的胰島素來進行科學實驗和臨床治療。然而，畢竟豬和牛的胰島素屬異種蛋白，進入人體后容易產生抗體，影響治療效果，并引起副反應。所以，目前臨床上廣泛應用的是重組人胰島素，即使用基因工程手段，將人的胰島素基因轉移到細菌或者酵母細胞中，然后利用發(fā)酵工藝，進行大規(guī)模的生產，從而得到大量、高純度的人胰島素。

同樣的，提取的轉鐵蛋白具有安全性差和批間差大等缺陷。尤其是將提取的轉鐵蛋白添加于用于細胞治療的無血清培養(yǎng)基中時，可能會將人或動物的病原體(如瘋牛病病毒，克雅氏病毒和其它未知病原體)藉回輸人體的細胞而帶入人體，從而發(fā)生非預期的疾病。而重組的轉鐵蛋白，則可*避免人或動物病原體污染的可能性，因此更適合用于配制細胞治療用的無血清培養(yǎng)基。

三 胰島素和轉鐵蛋白在無血清培養(yǎng)基中的使用濃度

胰島素

所培養(yǎng)的細胞不同，無血清培養(yǎng)基中所需的胰島素量也有所區(qū)別，一般在 1-10mg/L之間。

轉鐵蛋白在無血清培養(yǎng)基中的使用濃度

轉鐵蛋白

同樣的，細胞種類不同，對轉鐵蛋白的需求量也不同，下表謹供參考。具體的濃度還是要根據細胞的種類、狀態(tài)和想要實現(xiàn)的功能來通過實驗確定。

表 4：轉鐵蛋白在無血清細胞培養(yǎng)基中的添加濃度

資料來源：BioGems

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