細胞培養(yǎng)也叫細胞克隆技術,在生物學中的正規(guī)名詞為細胞培養(yǎng)技術。不論對于整個生物工程技術,還是其中之一的生物克隆技術來說,細胞培養(yǎng)都是一個不可少的過程,細胞培養(yǎng)本身就是細胞的大規(guī)??寺?。
細胞培養(yǎng)基的種類繁多,細胞培養(yǎng)方式也較多,如何正確地使用培養(yǎng)基及大程度地保持培養(yǎng)基的營養(yǎng)以維持細胞的生長,對每個培養(yǎng)者都很重要。培養(yǎng)基的使用依不同的培養(yǎng)基種類、培養(yǎng)方式、細胞種類的不同而存在差異。
下面為大家分享一下細胞培養(yǎng)基的使用注意事項。
1) 細胞培養(yǎng)用水一般為三蒸水(經(jīng)石英蒸餾器蒸餾)或超純水,醫(yī)藥生產上一般為注射用水。
2) 建議盡量選擇與所用量相匹配的包裝一次使用,因為包裝一旦打開,組分可能會變質或因受潮而結團。
3) 溶解干粉培養(yǎng)基時先加入終體積90%-95%的培養(yǎng)用水,添加劑加完后再補足。
4) 如需添加的組分較多時,某一組分*溶解后,再添加另一組分。
5) 待培養(yǎng)基*溶解后再加入碳酸氫鈉,以免產生沉淀。
6) 所有成分*溶解后,培養(yǎng)基應立即過濾或高壓除菌,以免產生沉淀或有微生物污染。
7) 在過濾除菌時,一般情況下應調pH比所需值低0.1~0.2個單位,因過濾除菌后,pH值會升高約0.2。
8) 在細胞培養(yǎng)過程中,建議不加或加少量的抗生素,如血清的濃度較低則所加抗生素的量也要相應降低一些。
9) 建議用1 N HCl或1 N NaOH來調節(jié)培養(yǎng)基的pH,因為用碳酸氫鈉來調對培養(yǎng)液的滲透壓影響比較大。